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高效液相色譜儀(HPLC/UPLC)的基本組成與各部分功能(按液路流向列出,含常見可選模塊): 溶劑槽(溶劑瓶) 存放流動相溶劑(多種溶劑用于等度或梯度)。需無顆粒、脫氣且標識清楚。 脫氣裝置(在線脫氣器 / 超聲/真空脫氣) 去除溶劑中溶解氣體,防止色譜基線噪聲和氣泡導致泵擊穿或檢測器噪點。 泵(恒流/高壓泵,單向、二元/三元/四元混合或梯度泵) 提供穩定可控的流速與工作壓力(普通HPLC到數百bar,UHPLC更高)。負責溶劑混配與梯度程序。 進樣裝置(手動進樣器或自動進樣器/樣品臺) 將樣品定量引入流路。自動樣品器支持不同進樣體積、稀釋、洗針、冷藏等功能。 前處理/除顆粒元件(進樣閥、濾器、前置柱/保護柱、在線SPE等) 保護主柱、去除微粒或濃縮/凈化樣品,延長色譜柱壽命并減少污染。 色譜柱(分離柱,含填料與維持柱溫的柱箱) 核心分離單元(反相C18、C8、HILIC、離子交換、尺寸排阻等),柱溫箱用于溫度控制以提高重現性。 檢測器(可選多種) 紫外/可見檢測器(UV/DAD/PDA):最常用,選擇性好。 熒光檢測器(FLD):高靈敏、選擇性強。 折光檢測器(RI):用于不吸UV的組分(受梯度限制)。 蒸發光散射檢測(ELSD)、電荷盒檢測(CAD):檢測非揮發性無色物質。 質譜(LC–MS/MS/高分辨MS):靈敏且用于結構鑒定和痕量定量。 其他:電化學檢測器等。 壓力/流量/溫度監測與保護元件(壓力傳感器、流量計、單向閥、泄壓裝置) 實時監控系統狀態,保護設備與柱子。 廢液/收集器(Fraction collector,可選) 收集目標組分或廢液,制備色譜常用。 數據采集與控制系統(工作站軟件) 控制泵、進樣器、梯度、柱溫與檢測器;采集與處理色譜譜圖,定量、報告與系統日志。 附件與外圍設備 樣品冷卻臺、自動清洗系統、超聲/超濾裝置、溶劑過濾器、密封件與接頭、備用柱、標準品與維護工具。 補充:UHPLC/UPLC 與普通HPLC 的不同點 更高耐壓的泵與密封件、更小內徑/更短柱、高壓耐受填料、低額外柱容(extra?column volume)以支持更快更高分辨率的分離。 典型液路示意(簡化) 溶劑槽 → 脫氣器 → 泵(混合/梯度) → 進樣器(/前處理) → 色譜柱(柱溫箱) → 檢測器 → 數據系統 → 廢液/分餾 |
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